การเตรียมสภาวะที่เหมาะสมในการเลี้ยง Caenorhabditis elegans เพื่อใช้เป็นโมเดล ในการทดสอบความเป็นพิษของสารจากธรรมชาติ |
| โดย: นางสาวกัญชลิกา มูลกัน,นางสาวกิ่งกาญจน์ แร่ทอง ปีการศึกษา: 2560 กลุ่มที่: 6 อาจารย์ที่ปรึกษา: จตุรงค์ ประเทืองเดชกุล , วรวรรณ กิจผาติ , วีณา นุกูลการ , สุเมธ จงรุจิโรจน์ , โสภาพรรณ รัตนประพันธ์พร ภาควิชา: ภาควิชาจุลชีววิทยา Keyword: Caenorhabditis elegans, สารสกัด, ตำรับยาอายุวัฒนะ, ความเป็นพิษเฉียบพลัน, LD50, Caenorhabditis elegans, Ayuwatana recipe, extract, acute toxicity, LD50 |
| บทคัดย่อ: Caenorhabditis elegans จัดอยู่ในอาณาจักร Animalia ไฟลัม Nematoda ซึ่งจัดเป็นหนอนพยาธิตัวกลมที่มีการนำมาใช้เป็นโมเดลในการทดสอบความเป็นพิษ เนื่องจากยีนของ C. elegans มีความคล้ายคลึงกับยีนของมนุษย์จึงได้จัดทำโครงการพิเศษนี้เพื่อศึกษาและเตรียมสภาวะที่เหมาะสมในการเลี้ยง C. elegans ในการใช้เป็นโมเดลสำหรับทดสอบความเป็นพิษของสารสกัดด้วยน้ำของยาอายุวัฒนะ ผลพบว่าสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยง C. elegans คือ ที่อุณหภูมิประมาณ 22 องศาเซลเซียส อาหารที่ใช้เลี้ยงคือแบคทีเรีย Escherichia coli ที่ถูกเพาะเลี้ยงในอาหารสูตร NGM การพัฒนาเป็นระยะต่างๆของ C. elegans โดยจะเริ่มจากระยะที่เป็นไข่ จากนั้นจะพัฒนาต่อไปเป็น L1, L2, L3, L4 และ adult ตามลำดับ ในโครงการพิเศษนี้นำ C. elegans ระยะ adult มาใช้เป็นแบบจำลองสำหรับการทดสอบความพิษเฉียบพลันของสารสกัดน้ำของตำรับยาอายุวัฒนะ ซึ่งมีส่วนประกอบวัตถุดิบสมุนไพรในตำรับ ได้แก่ เนื้อในกระเทียม 45 กรัม ดีปลี 15 กรัม พริกไทย 15 กรัม ลูกยอผลแก่ใกล้สุก 195 กรัม บอระเพ็ด 90 กรัม หัวแห้วหมู 15 กรัม และหัวขิงแก่ 15 กรัม จากการศึกษาความเป็นพิษเฉียบพลันใน C. elegans โดยทำการทดสอบทั้งหมด 3 ซ้ำ พบว่า ความเป็นพิษเฉียบพลันของสารสกัดด้วยน้ำของตำรับยาอายุวัฒนะต่อ C. elegans ระยะ adult มีค่าเฉลี่ย LD50 เท่ากับ 176.99 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร จากการศึกษาเบื้องต้นนี้แสดงให้เห็นว่า C. elegans อาจเป็นอีกทางเลือกหนึ่งสำหรับโมเดลการทดสอบในสิ่งมีชีวิต เพื่อใช้ในการทดสอบพิษเบื้องต้นเนื่องจากเป็นวิธีที่ง่าย รวดเร็ว และต้นทุนไม่สูง |
| abstract: Caenorhabditis elegans is a member of the Kingdom Animalia, the phylum Nematoda, classified as the round worm. Animals are used as models to test toxicity because several genes of C. elegans are similar to those of humans. The objectives of this special project is to study and optimize culture conditions of C. elegans to be used as a model in toxicity testing for water extract of Ayuwatana recipe. The result showed that optimal conditions for C. elegans culture was about 22°C and normally grew on NGM agar plates containing a lawn of the bacterium Escherichia coli. The development of C. elegans progessed from eggs and then further developed as L1, L2, L3, L4 and adult, respectively. In this study, adult C. elegans was used as a model in acute toxicity testing for water extract of Ayuwatana recipe. Ayuwatana recipe comprised of various herbal materials including Garlic 15 g, Long pepper 15 g, Pepper 15 g, Noni 195 g, Heart-leaved moonseed 90 g, Nut grass 15 g and Ginger 15 g. Three studies of acute toxicity of water extract Ayuwatana recipe in adult C. elegans was represented as the average LD50 values of 176.99 mg/mL. This study presented that C. elegans may be alternative model for in vivo toxicity testing because it is easy, rapid and inexpensive. |
| . |