การวิเคราะห์ปริมาณสารกลุ่มฟีโนลิกและ สารฟลาวานอยด์ในขลู่และผลิตภัณฑ์ชาขลู่ ด้วยวิธี HPTLC method |
| โดย: นางสาวธัชรินทร์ หอมสุคนธ์,นางสาววสุนธรา สนั่นไหว ปีการศึกษา: 2560 กลุ่มที่: 42 อาจารย์ที่ปรึกษา: ศวิตา จิวจินดา , ปัทมพรรณ โลมะรัตน์ , ปองทิพย์ สิทธิสาร ภาควิชา: ภาควิชาอาหารเคมี Keyword: กรดคลอโรจีนิก, กรด 3,4 ไดคาเฟอิลควินิก, กรด 3,5 ไดคาเฟอิลควินิก, วิธีเอชพีทีแอลซี, chlorogenic acid, 3,4 dicaffeoylquinic acid and 3,5 dicaffeoylquinic acid, HPTLC densitometry |
| บทคัดย่อ: โครงการพิเศษนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อพัฒนาและตรวจสอบความถูกต้องของวิธีรงคเลขผิวบางสมรรถนะสูง (เอชพีทีแอลซี) ด้วยเครื่องเดนซิโตมิเตอร์ในการวิเคราะห์หาปริมาณกรดคลอโรจีนิก(ซีจีเอ) , กรด 3,4 ไดคาเฟอิลควินิก(3,4 ดีซีคิวเอ) และกรด 3,5 ไดคาเฟอิลควินิก(3,5 ดีซีคิวเอ) ในสารสกัดจากใบขลู่และผลิตภัณฑ์จากขลู่ที่มีขายในท้องตลาด ใบขลู่มีฤทธิ์ทางชีวภาพหลากหลายเช่น ฤทธิ์ต้านอักเสบ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ ฤทธิ์ต้านมะเร็ง และฤทธิ์สมานแผล ขลู่เป็นสมุนไพรที่นิยมใช้อย่างแพร่หลายในประเทศไทยเนื่องจากมีสรรพคุณในการรักษาโรคเบาหวาน มะเร็ง ความดันโลหิตสูง กระเพาะปัสสาวะอักเสบและสมานแผล การวิเคราะห์โดยวิธีเอชพีทีแอลซีโดยใช้แผ่นเอชพีทีแอลซีอะลูมิเนียมที่มีซิลิก้าเจลเบอร์เอฟ 254 ในวัฏภาคเคลื่อนที่อัตราส่วน เอทิล อะซิเตท ต่อ น้ำ ต่อ กรดฟอร์มิก ต่อ โทลูอีนเท่ากับ 20 ต่อ 2 ต่อ 2 ต่อ 1 และใช้ วินแคทส์ ซอฟแวร์ จาก ทีแอลซี สแกนเนอร์ 3 (คาแมก สวิตเซอร์แลนด์) ในการตรวจเด็นซิโตแกรมที่ความยาวคลื่น 326 นาโนเมตร การตรวจสอบความถูกต้องของวิธีทีแอลซี-เด็นซิโตเมทรี ซึ่งได้อ้างอิงตามแนวทางการปฏิบัติของ ICH พบว่าตัวแปรที่ใช้ประเมินวิธีการตรวจสอบความถูกต้องของวิธีนี้อยู่ในเกณฑ์ที่ยอมรับได้ ดังนี้ ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์มีค่ามากกว่า 0.995 ความแม่นยำของการวิเคราะห์ภายในวันเดียวและต่างวันกันมีค่าร้อยละเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์น้อยกว่า ร้อยละ 5 มีค่าเฉลี่ยร้อยละการคืนกลับของซีจีเอ 3,4 ดีซีคิวเอ 3,5 ดีซีคิวเอ เท่ากับร้อยละ 99.04, 97.51 และ 99.64 ตามลำดับ ขีดจำกัดในการตรวจวัดซีจีเอ 3,4 ดีซีคิวเอ 3,5 ดีซีคิวเอ เท่ากับ 9.92, 17.58 และ 6.68 นาโนกรัมต่อแถบสาร ในขณะที่ขีดจำกัดในการวัดเชิงปริมาณซีจีเอ 3,4 ดีซีคิวเอ 3,5 ดีซีคิวเอ เท่ากับ 30.05, 53.27 และ 20.24 นาโนกรัมต่อแถบสารตามลำดับ การวิเคราะห์ปริมาณสารสกัดจากจังหวัดต่างๆในประเทศไทยทั้งหมด 9 จังหวัด ผลิตภัณฑ์ขลู่ที่เตรียมเองและจากผลิตภัณฑ์ขลู่ 9 ยี่ห้อพบว่า ปริมาณของซีจีเอ, 3,4 ดีซีคิวเอ, 3,5 ดีซีคิวเอ มีปริมาณร้อยละโดยมวลอยู่ในช่วง ไม่สามารถวัดปริมาณได้ - 2.29 ± 0.02 %w/w, 0.30 ± 0.04 %w/w - 3.77 ± 0.03 %w/w และ 0.50 ± 0.15 %w/w - 4.72 ± 0.10 %w/w ตามลำดับ การควบคุมคุณภาพโดยวิธีเอชพีทีแอลซีนี้ มีข้อดีหลายประการ อาทิเช่น มีความรวดเร็ว น่าเชื่อถือ ใช้สารเคมีในปริมาณน้อย และ ประหยัดค่าใช้จ่ายในการวิเคราะห์ |
| abstract: The study was conducted to develop and validate a high performance thin-layer chromatography (HPTLC method) for the quantitative analysis of cholorogenic acid (CGA), 3,4 dicaffeoylquinic acid (3,4 DCQA) and 3,5 dicaffeoylquinic acid (3,5 DCQA) in Pluchea indica leaf extract and their commercial products in Thailand. Several biological activities of P. indica has been reported such as anti-inflammatory, anti-oxidation, anti-tumor and anti-ulcer activities. P. indica has been widely used in Thai herbal medicine for the treatment of diabetes mellitus, cancer, hypertension, cystitis and wound-healing. HPTLC analysis was performed on an aluminium sheet of silica gel 60 F254 using ethyl acetate: water: formic acid: toluene (20:2:2:1, v/v/v/v) as a mobile phase. The densitometric scanning was performed by TLC Scanner 3 (Camag, Switzerland) with winCATS software at the wavelength 326 nm. HPTLC method was validated according to ICH guideline. The proposed HPTLC method showed acceptable validation parameters. The correlation coefficient value was > 0.995. Intra-day and inter-day precisions with relative standard deviations of less than 5%. The average percentage recoveries of CGA, 3,4 DCQA and 3,5 DCQA were 99.04, 97.51 and 99.64 respectively. The LOD of CGA, 3,4 DCQA and 3,5 DCQA were found to be 9.92, 17.58 and 6.68 ng/band while the LOQ of CGA, 3,4 DCQA and 3,5 DCQA were 30.05, 53.27 and 20.24 ng/band, respectively. For quantitative analysis, it was found the content of CGA, 3,4 DCQA and 3,5 DCQA were in the ranges of not detected - 2.29 ± 0.02 %w/w, 0.30 ± 0.04 - 3.77 ± 0.03 %w/w and 0.50 ± 0.15 - 4.72 ± 0.10 %w/w respectively. HPTLC densitometric method showed several advantages such as rapid, reliable, less solvents used, and low cost analysis. |
| . |