การตรวจฤทธิ์ทำลายเซลล์มะเร็งของผลบวบขม |
| โดย: เกสร เทพแปง,ดุลาลัย เสฐจินตนิน ปีการศึกษา: 2538 กลุ่มที่: 3 อาจารย์ที่ปรึกษา: ปริ่มเฉนียน มุ่งการดี , วีณา จิรัจฉริยากูล , ยุพิน รุ่งเวชวุฒิวิทยา ภาควิชา: ภาควิชาจุลชีววิทยา Keyword: , |
| บทคัดย่อ: บวบขม (Trichosanthes cucumerina L., Family Cucurbitaceae) เป็นพืชล้มลุก จำพวก ไม้เถาเลื้อยไม่นำมารับประทานเป็นอาหาร แต่นำมาใช้ประโยชน์เป็นพืชสมุนไพรประจำบ้าน การศึกษานี้มุ่งสนใจศึกษาถึงความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งของบวบขม โดยนำผลบวบขม มาคั้นสกัดด้วย ether และแยกสารโดยวิธี low pressure chromatography ได้สาร TC1 หลังจากนั้น แยกต่อจนได้สาร cucurbitacin B และ dihydrocucurbitacin B และนำส่วนรากมาสกัดด้วย soxhlet apparatus ใช้ petroleum ether, chloroform เป็นตัวทำลายตามลำดับ แล้วนำส่วน chloroform มาแยกต่อจนได้ สารบริสุทธิ์ SCs นำสารมาทดสอบฤทธิ์การทำลายเซลล์มะเร็งโดยวิธี MTT assay ซึ่งเป็นวิธีตรวจสอบการมีชีวิตและการแบ่งตัวของเซลล์ โดยดูผลของการใช้ enzyme succinate dehydrogenase จาก mitochondria ย่อยสลายสาร tetrazolium salt MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] ได้สาร formazan ซึ่งมีสีฟ้า วัดผลโดยใช้ automatic plate reader ดูการเปลี่ยนแปลงของสีที่เกิดขึ้น พบว่าฤทธิ์ของ cucurbitacin B, dihydrocucurbitacin B และ TC1 ต่อ SK-BR-3 (breast cancer cell line) ได้ค่า ED50 0.05, 0.4 และ 0.48 microgram/ml ตามลำดับ แสดงว่าสารทั้ง 3 ชนิด มีฤทธิ์เป็นพิษต่อเซลล์มะเร็ง ส่วน SC4 มีความเป็นพิษต่อ SK-BR-3 ต่ำ มีค่า ED50 มากกว่า 200 microgram/ml |
| abstract: Trichosanthes cucumerina L., family Cucurbitaceae, is shrub and climbing plant. It is not used as diet but it is used as traditional medicine.Cytotoxic effect of purified constituents from Trichosanthes cucumerina L. on SK-BR-3 (breast cancer cell line) was performed. TC1 isolated from fruits by ether extract was further seperated by low pressure chromatography.Two pure substances, i.e. cucurbitacin B and dihydrocucurbitacin B was obtained. Isolation from the roots with soxhlet apparatus was also performed by using petroleum ether and chloroform as solvents for extraction. SC4 fraction from chloroform extract was further to get pure substances, i.e. SC4. All purified substances were tested for the cytotoxicity by MTT colorimetric assay. The method to evaluate the cell survival and proliferation from cleavage of the tetra zolium salt MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide] into a blue colored product (formazan) by the mitochondrial enzyme, succinate dehydrogenase. The results were detected the change of the color by automatic microtiterplate reader. Cucurbitacin B, dihydrocucurbitacin B and TC1 were found to be very cytotoxic on SK-BR-3 at ED50 0.05, 0.4 and 0.48 microgram/ml respectively whereas SC4 caused low effect in the test system and ED50 was more than 200 microgram/ml. |
| . |