การเตรียมสารสกัดบริสุทธิ์จากหญ้าปักกิ่ง |
| โดย: สิริมา สอนเล็ก,สุดาทิพ เกียรติศรีชาติ ปีการศึกษา: 2539 กลุ่มที่: 26 อาจารย์ที่ปรึกษา: วีณา จิรัจฉริยากูล , พรรนิภา ชุมศรี ภาควิชา: ภาควิชาเภสัชวินิจฉัย Keyword: , |
| บทคัดย่อ: การเตรียมสารบริสุทธิ์จากหญ้าปักกิ่ง (Purified Murdannia Extract) จัดทำขึ้นเพื่อใช้เป็นวัตถุดิบในการทดลองผลิตยาเม็ดหรือแคปซูลหญ้าปักกิ่ง (Murdannia tablet) ซึ่งมีคุณสมบัติเป็นพิษต่อเซลล์ปานกลาง (moderate cytotoxic) โดยเตรียมหญ้าปักกิ่งสด (ทั้งต้น) 45 kg นำมาล้าง อบแห้ง และทำเป็นผงยาแห้ง 2.7 kg สกัดผงยาด้วยตัวทำละลายต่างๆ ได้แก่ ปิโตรเลียมอีเทอร์, คลอโรฟอร์ม และเอทานอลตามลำดับ จากนั้นนำสารสกัดเอทานอลมาแยกองค์ประกอบทางเคมีโดยใช้ MCI gel CHP 20 P column ซึ่งเป็นpolystyrene resin มีคุณสมบัติแยกองค์ประกอบเคมีที่มีความเป็นขั้วสูง เช่น น้ำตาล กรดอะมิโน ออกจากองค์ประกอบเคมีที่ความเป็นขั้วรองลงมา เช่น สารประกอบฟีนอลิกและซาโปนิน รวบรวม fraction ที่เป็น glycosides ซึ่งถูก eluted จาก colume ด้วยเมทานอลและนำมาวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีด้วย thin layer chromatography เปรียบเทียบกับสารมาตราฐาน คือ 3-O-beta-D-glucopyranosyl-24-ethyl-cholesta-5-ene ซึ่งเป็น glycoside ที่แยกได้จากหญ้าปักกิ่ง solvent system ที่ใช้ ประกอบด้วย chloroform: methanol = 15:5 โดยใช้ silica gel GF 254 Alufolien เป็น Stationary phase พบว่าใน glycoside fraction มีสาร 3-O-beta-D-glucopyranosyl-24-ethyl-cholesta-5-ene และ glycosphingolipid เป็นองค์ประกอบสำคัญโดย impurity บางส่วนได้ถูกสกัดแยกออกไป จากนั้นนำ glycoside fraction ที่แยกได้มาทำให้เป็นผงโดยใช้ความเย็น (lyophilization) ในการทดลองนี้ได้นำสารสกัดเอทานอลมาใช้ในการเตรียมสารสกัดบริสุทธิ์โดยทำการทดลองซ้ำ 3 ครั้งซึ่งให้ผลการทดลองที่ “reproducible” คือ อัตราส่วนของน้ำหนักสารสกัดเอทานอลเปรียบเทียบกับน้ำหนัก glycoside fraction ที่ทำให้เป็นผงโดยใช้ความเย็นมีค่าเฉลี่ย 8:1 และเมื่อนำ glycoside fraction ที่ผ่านการทำให้แห้งด้วยการใช้ความเย็นมาวิเคราะห์ด้วย thin layer chromatography อีกครั้ง พบว่ายังคงมีสาร 3-O-beta-D- glucopyranosyl-24-ethyl-cholesta-5-ene และ glycosphingolipid เป็นองค์ประกอบสำคัญ |
| abstract: Murdannia loriformis ( Hassk. ) Rolla Rao et Kammathy was prepared as a purified extract. Fresh whole plant , 45 kg , were washed, dried and grounded. The powdered drug was successively extracted with petroleum ether, chloroform and ethanol, respectively. The ethanol extract ( 101.94 g ) was put on MCI gel CHP 20 P column , which was composed of polystyrene resin. The plant components were seperated according to the polarity. The most polar ones came first , followed by the less polar ones. The aqueous fraction contained sugars , inorganic salts and amino acids. The aqueous - methanol fraction ( 1 : 1 ) contained phenolic compounds. The methanol fraction contained glycosides. The glycoside fractions were collected and analysed on TLC using the solvent system of chloroform - methanol ( 15 - 5 ), and silica gel GF 254 Alufolien ( Merck ) as a stationary phase. 3 - O - beta - D - glucopyranosyl - 24- ethyl - cholesta - 5 - ene and a glycosphingolipid , which were isolated from Murdannia loriformis were used as reference compound. It was found that the prepared glycoside fraction contained the reference compounds as major components.The fraction was then lyophilizied. The above preparation of the purified extract were repeated three times. The results obtained were reproducible. The ratio of ehtanol extract to lyophilized glycosides were 8 : 1 weight by weight. |
| . |