การศึกษาสารที่ออกฤทธิ์ต้านเชื้อจุลชีพจากสเตรปโตมัยซีสทางทะเล จีนัส CH-17

โดย: เพ็ญนภา อุทยานรักษา, หนึ่งฤทัย เกียรตินันทน์    ปีการศึกษา: 2552    กลุ่มที่: 24

อาจารย์ที่ปรึกษา:    ภาควิชา: ภาควิชาเภสัชวินิจฉัย

Keyword: สเตรปโตมัยซีส, ฤทธิ์ต้านเชื้อจุลชีพ , 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone ,อนุพันธ์ geldanamycin, Streptomyces, antimicrobial activity, 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone, geldanamycin hydroquinone, geldanamycin derivatives
บทคัดย่อ:
โครงการพิเศษนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาหาสารออกฤทธิ์ต้านเชื้อจุลชีพจากสเตรปโตมัยซีส สายพันธุ์ CH -17 ทางทะเลที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพ สิ่งสกัดด้วยเอธิลอะซิเตตจากน้ำหมักเชื้อของสายพันธุ์นี้แสดงฤทธิ์ต้านเชื้อ Bacillus subtilis Micrococcus luteus Staphylococcus aureus และ MRSA อย่างมีนัยสำคัญ ทำการหาตำแหน่งสารสำคัญที่แสดงฤทธิ์บน TLC ด้วยวิธี bioautography โดยใช้ระบบนำพาคือ dichloromethane : methanol ในอัตราส่วน 9:1 โดยปริมาตร เมื่อทำการแยกสารให้บริสุทธิ์ด้วยวิธีทางโครมาโตกราฟฟีควบคู่กับการทดสอบฤทธิ์สามารถแยกอนุพันธ์ของ geldanamycin ได้ 2 ชนิด คือ 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone และ geldanamycin hydroquinone การพิสูจน์โครงสร้างทางเคมีของสารที่แยกได้เหล่านี้ ทำได้โดยการวิเคราะห์ข้อมูลทาง IR MS UV และ NMR ร่วมกับการเปรียบเทียบข้อมูลที่มีการรายงานมาแล้ว สาร 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone ที่ความเข้มข้น 128 ไมโครกรัม/ดิสก์ แสดงฤทธิ์ต้านเชื้อ MRSA อย่างมีนัยสำคัญ โดยให้เส้นผ่านศูนย์กลางบริเวณที่เชื้อไม่ขึ้นได้ 17.1 มิลลิเมตร ในขณะที่สาร geldanamycin hydroquinone ไม่แสดงฤทธิ์ต้านเชื้อ MRSA และที่น่าสนใจคือ 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone และ geldanamycin hydroquinone ที่ความเข้มข้น 128 ไมโครกรัม/ดิสก์ แสดงฤทธิ์เสริมกับยา ketoconazole ในการยับยั้ง Candida albicans โดยให้เส้นผ่านศูนย์กลางบริเวณที่เชื้อไม่ขึ้นได้ 22.0 และ 21.5 มิลลิเมตร ตามลำดับ
abstract:
This present investigation aimed to search for antimicrobial-active substances from marine Streptomyces strain CH-17. The antimicrobial activity screening of the ethyl acetate extracts from fermentation broth of this strain exhibited significant the activity against Bacillus subtilis, Micrococus luteus, Staphylococcus aureus, and MRSA. The bioautography method using dichloromethane : methanol (9:1 v/v) as solvents was conducted to find the active component on TLC. The bioassay-guided fractionation of the ethyl acetate extract led to isolation of two geldanamycin derivatives, including 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone and geldanamycin hydroquinone. Their identifications and structure elucidations were achieved by extensive analyses of UV, IR, MS, and NMR spectroscopic data as well as comparison with the literatures. 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone exhibited significant anti-MRSA with the inhibition zone of 17.1 mm., at concentration of 128 mcg/disc, while geldanamycin hydroquinone showed no anti-MRSA activity. Interestingly, 17-O-demethyl geldanamycin hydroquinone and geldanamycin hydroquinone demonstrated synergistic activity with ketoconazole against Candida albicans with the inhibition zones of 22.0 and 21.5 mm, respectively, at concentration of 128 mcg/disc.
.