การศึกษาองค์ประกอบทางเคมีและฤทธิ์ต้านจุลชีพของแอคติโนมัยซีสทางทะเล รหัส ทีวี1-6

โดย: วราภรณ์ ฉันทร์มิตรกุล, ณัฐวดี รักไพรสุเทพสิริ    ปีการศึกษา: 2554    กลุ่มที่: 22

อาจารย์ที่ปรึกษา: วีนา นุกูลการ , จตุรงค์ ประเทืองเดชกุล    ภาควิชา: ภาควิชาเภสัชวินิจฉัย

Keyword: แอคติโนมัยซีส, ฤทธิ์ต้านเชื้อจุลชีพ, 17-O-demethylgeldanamycin, bioautography , Actinomycete, antimicrobial activities, 17-O-demethylgeldanamycin, bioautography
บทคัดย่อ:
โครงการพิเศษนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาองค์ประกอบทางเคมีที่มีฤทธิ์ต้านเชื้อจุลชีพของสารสำคัญจากเชื้อจุลชีพแอคติโนมัยซีสทางทะเล รหัสทีวี1-6 สารสกัดด้วยเอธิลอะซิเตตจากน้ำหมักเชื้อสายพันธุ์นี้แสดงฤทธิ์ต้านเชื้อ Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus และ Candida albicans อย่างมีนัยสำคัญ ทำการหาตำแหน่งสารสำคัญที่แสดงฤทธิ์บน TLC ด้วยวิธี bioautography โดยใช้ระบบนำพาคือ dichloromethane : methanol ในอัตราส่วน 9:1 โดยปริมาตร เมื่อทำการแยกสารให้บริสุทธิ์ด้วยวิธีทางโครมาโทกราฟีต่างๆ ควบคู่กับการทดสอบฤทธิ์ สามารถแยกสารสีเหลืองได้ 1 ชนิด พิสูจน์โครงสร้างทางเคมีของสารที่แยกได้โดยการวิเคราะห์ด้วยเทคนิคทางสเปคโตรสโคปี ได้แก่ UV และ NMR พร้อมทั้งเปรียบเทียบกับข้อมูลที่เคยรายงาน พบว่าสารบริสุทธิ์สีเหลืองที่ได้เป็นสารอนุพันธ์ของ geldanamycin คือ 17-O-demethylgeldanamycin นำมาทดสอบฤทธิ์ในการต้านเชื้อจุลชีพต่อเชื้อ Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), Staphylococcus aureus และ Bacillus subtilis ด้วยวิธี disc diffusion พบว่า สารบริสุทธิ์ที่แยกได้ แสดงฤทธิ์ในการต้านเชื้อจุลชีพที่น่าสนใจ สามารถวัดเส้นผ่านศูนย์กลางบริเวณที่เชื้อไม่เจริญได้ 7.7, 8.3 และ 14.3 มิลลิเมตร ตามลำดับ และเมื่อนำสารมาทดสอบฤทธิ์ต่อการแบ่งตัวของเชื้อแบคทีเรีย โดยดูผลจากลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเชื้อ E. coli สายพันธุ์ JE 6617 พบว่า สารไม่มีผลยับยั้งการแบ่งตัวของเชื้อ E. coli JE 6617 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม
abstract:
The purpose of this special project is to search for antimicrobial-active substance from marine Actinomycete strain TV1-6. The screening antimicrobial activity of the ethyl acetate extract from fermentation broth of this strain exhibited significantly the activity against Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus and Candida albicans. The bioautography method using dichoromethane : methanol (9: 1 V/V) as mobile phase was conducted to find the active component on TLC. The bioassay-guided fractionation of the ethyl acetate extract led to the isolation of the pure yellow compound. Identifications and structure elucidation were achieved by extensive analyses of UV and NMR spectroscopic data. Through analysis of the spectral data and comparison with earlier reports, yellow compound was established as geldanamycin derivative, namely 17-O-demethylgeldanamycin. The antimicrobial activity against Methicillin-resistant S. aureus (MRSA), S. aureus and B. subtilis of this compound was tested using disc diffusion method. The results showed that this compound exhibited remarkable antimicrobial activity with the inhibition zones of 7.7, 8.3 and 14.3 mm, respectively. This compound was also examined for its effect on the morphology of E. coli JE 6617 under microscope. The result showed that the morphology of E. coli JE 6617 was unchanged.
.