การพัฒนาอนุภาคแม่เหล็กเพื่อตรวจหายีนบ่งชี้โรคมะเร็ง

โดย: นางสาวชมกนก อโนทัยสินทวี,นายธานี นันทศิรนาท    ปีการศึกษา: 2555    กลุ่มที่: 13

อาจารย์ที่ปรึกษา: วิเชษฐ์ ลีลามานิตย์ , มนตรี ยะสาวงษ์    ภาควิชา: ภาควิชาชีวเคมี

Keyword: magnetics particles, polymerase chain reaction, TP53 (Arg72Pro), Electrophoresis, magnetics particles, polymerase chain reaction , TP53 (Arg72Pro) , electrophoresis
บทคัดย่อ:
โครงการพิเศษนี้จัดทำขึ้นเพื่อศึกษาและพัฒนาวิธีการนำอนุภาคแม่เหล็กมาประยุกต์ใช้ในการคัดแยกดีเอ็นเอออกจากอะกาโรสเจล โดยวิธีการศึกษามีดังนี้ ขั้นตอนแรกจะทำการสังเคราะห์อนุภาคแม่เหล็กโดยใช้วิธีการตกตะกอนร่วมระหว่าง ?"FeCl" ?_"2" ".4" "H" _"2" "O" และ ?"FeCl" ?_"3" ".6" "H" _"2" "O" โดยใช้ด่างและความร้อนเป็นตัวเร่งปฏิกิริยา จากนั้นจึงทำการวัดขนาดและความสม่ำเสมอของอนุภาคแม่เหล็กโดยใช้ Zeta Sizer 2000 และ FT-IR ขั้นตอนที่สองจะนำตัวอย่างดีเอ็นเอที่ใช้ในการทดลองซึ่งได้มาจากชิ้นส่วนดีเอ็นเอของยีน TP53 (Arg72Pro) ซึ่งเป็นยีนที่เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคมะเร็งปอด โดยใช้วิธีการเพิ่มขยายชิ้นส่วนดีเอ็นเอในหลอดทดลอง (พีซีอาร์ เทคนิค) ในขั้นตอนสุดท้ายจึงนำอนุภาคแม่เหล็กดังกล่าวมาช่วยสกัดยีนมะเร็งออกจากเจล โดยทำการเปรียบเทียบกับชุดสกัดดีเอ็นเอจากเจลสำเร็จรูป Simax?PCR Products/Agarose Gel Purification kit พบว่า ดีเอ็นเอที่ได้จากการสกัดด้วยอนุภาคแม่เหล็ก กับชุดสกัดดีเอ็นเอจากเจลสำเร็จรูป Simax?PCR Products/Agarose Gel Purification kit มีปริมาณและคุณภาพที่ใกล้เคียงกัน
abstract:
The aim of the special project is to develop magnetic particles for isolation of DNA from agarose gel. ?"FeCl" ?_"2" ".4" "H" _"2" "O" and ?"FeCl" ?_"3" ".6" "H" _"2" "O" was co-precipitated in ammonia solution and by a heating process. The size and size distribution of magnetic particles were investigated by Zeta Sizer 2000 and FT-IR. PCR product of TP53 (Arg72Pro), which is a lung-cancer related gene, was treated as the DNA sample for the isolation by the magnetic particles. The PCR product was recovered from agarose gel by magnetic particles and a commercial kit (Simax? PCR Products/Agarose Gel Purification kit). The purity and quantity from these two methods were compared, showing similar quality and quantity.
.