การสร้างสารต้านเชื้อก่อสิวและจุลินทรีย์อื่นจากแบคทีเรียในดิน |
| โดย: นางสาวศุภาพิชญ์ พิทยานุกุล, นางสาวเพชรรัตน์ ศฤงคารเจษฏา ปีการศึกษา: 2557 กลุ่มที่: 6 อาจารย์ที่ปรึกษา: แม้นสรวง วุฒิอุดมเลิศ ภาควิชา: ภาควิชาจุลชีววิทยา Keyword: แบคทีเรียจากดิน, ฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย, MBC, P. acnes, soil bacteria , antibacterial activity, MBC, P. acnes |
| บทคัดย่อ: โครงการพิเศษนี้ มีวัตถุประสงค์ในการคัดแยกแบคทีเรียจากดิน ที่สามารถสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ เพื่อให้ได้แบคทีเรียสายพันธุ์ที่ดีที่สุดในการสร้างสารต้านแบคทีเรียทั่วไปและแบคทีเรียที่สัมพันธ์กับการเกิดสิววิธีการเริ่มจากนำตัวอย่างดิน จากสถานที่ต่างๆในกรุงเทพ- มหานคร จำนวน 8 ตัวอย่าง มาคัดเลือกแบคทีเรียโดยใช้ crowded plate technique หลังจากนั้น นำแบคทีเรียที่คัดเลือกมาทดสอบกับแบคทีเรียมาตรฐาน 8 ชนิดด้วยวิธี cross streak และคัดเลือกแบคทีเรียจากดินที่สามารถยับยั้งแบคทีเรียมาตรฐานจำนวนมากที่สุด ซึ่งเลือกได้ 3 สายพันธุ์ คือสายพันธุ์ 1, 2/10 และ 3/3 และนำทั้งสามสายพันธุ์ มาเพาะเลี้ยงใน Tryptic Soy broth (TSB) ที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลา 5 วัน และทำการสกัดโดยทำให้สารอาหารที่ใช้เลี้ยงเข้มข้นขึ้น (aqueous extract) และการใช้เอธิล อะซีเตด (ethanolic extract) จากนั้นนำสารสกัดที่ได้ มาทดสอบฤทธิ์ด้วยวิธี broth microdilution กับแบคทีเรียมาตรฐาน 8 ชนิดและ P. acnes 5 สายพันธุ์ ผลการทดสอบการออกฤทธิ์ bactericidal โดยใช้ค่า Minimum Bactericidal Concentration (MBC) พบว่า สารสกัดชนิด aqueous extract คือ 1, 2/10, 3/3 และ ethanolic extract คือ 1EA, 2/10EA, 3/3EA แสดงฤทธิ์ bactericidal ต่อ P.acnes และแบคทีเรียมาตรฐานได้ ข้อมูลการวิจัยครั้งนี้ชี้ให้เห็นถึงศักยภาพของแบคทีเรียจากดิน ในการสร้างสารสำคัญที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพ ดังนั้นในการศึกษาจุลินทรีย์จากดินครั้งต่อไปอาจใช้สภาวะการเพาะเลี้ยง วิธีสกัดที่ต่างกัน หรือใช้การดัดแปลงทางพันธุกรรมเพื่อให้แบคทีเรียสามารถสร้างสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่ดีขึ้น |
| abstract: This project is focused on isolation of soil bacteria and testing for their production of antimicrobial components against bacteria including P. acnes. From 8 soil samples collected from over Bangkok area, three soil bacteria, namely 1, 2/10 and 3/3 were isolated using crowded plate technique and were selected by cross streak method against 8 standard bacteria. These isolates were cultured in tryptic soy broth (TSB) at 37°C for 5 days. The concentrate filtrate was collected as the aqueous extracts and by the use of ethyl acetate, the ethanolic extracts were obtained. These extracts were tested for their antibacterial properties on 8 bacteria and 5 strains of P.acnes. It was found that the aqueous extracts 1, 2/10, 3/3 and the ethanolic extracts 1EA, 2/10EA, 3/3EA showed their bactericidal properties represented by the value of Minimum Bactericidal Concentration (MBC) on tested bacteria. The results of this study indicated the strong potential of soil bacteria on their ability to produce several significant bioactive substances. Therefore, further investigation of soil microorganisms can be done by varying culture conditions, extraction methods or genetic modification in order to strengthen the antimicrobial activity of bioactive components. |
| . |