การคัดแยกหาเอนโดไฟติกแบคทีเรีย ที่มีฤทธิ์ต้านเชื้อจุลินทรีย์ |
| โดย: นางสาวจุรีพรรณ ภูมิสถิตย์พงษ์, นางสาวณัฐกานต์ สุรีย์พงษ์ ปีการศึกษา: 2559 กลุ่มที่: 3 อาจารย์ที่ปรึกษา: สุเมธ จงรุจิโรจน์ , จตุรงค์ ประเทืองเดชกุล ภาควิชา: ภาควิชาจุลชีววิทยา Keyword: เอนโดไฟติกแบคทีเรีย, จุลินทรีย์จากพืช, ฤทธิ์ต้านเชื้อจุลินทรีย์, endophytic bacteria, microorganism from plants, antimicrobial activities |
| บทคัดย่อ: โครงการพิเศษนี้จัดทาขึ้นเพื่อคัดแยกหาเอนโดไฟติกแบคทีเรียที่มีฤทธิ์ในการต้านเชื้อจุลินทรีย์จากตัวอย่างพืชในกรุงเทพมหานครจานวน 17 ชนิด สามารถคัดแยกเอนโดไฟติกแบคทีเรียได้ทั้งหมด 58 ไอโซเลต เมื่อนามาทดสอบฤทธิ์ต้านการเจริญเติบโตของเชื้อทดสอบ 7 ชนิด ได้แก่ Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumonia ATCC 700603, Methicillin-resistance Staphylococcus aureus (MRSA) ATCC 43300, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Salmonella typhi ATCC 13311 และ Staphylococcus aureus ATCC 6538 โดยทดสอบ 2 วิธี ได้แก่ 1) วิธี Cross streak method โดยนาเอนโดไฟติกแบคทีเรียขีดเป็นเส้นกลางบน Tryptic soy agar (TSA) และทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 48 ชั่วโมง จากนั้นนาเชื้อทดสอบทั้ง 7 ชนิดมาขีดใกล้กับเอนโดไฟติกแบคทีเรียในแนวตั้งฉาก และบ่มที่อุณหภูมิ 37ºC เป็นเวลา 24 ชั่วโมง พบว่าเอนโดไฟติกแบคทีเรียที่มีฤทธิ์ยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อทดสอบ มีจานวน 20 ไอโซเลต, 13 ไอโซเลต, 4 ไอโซเลต, 19 ไอโซเลต, 2 ไอโซเลต, 15 ไอโซเลต, และ 20 ไอโซเลตตามลาดับ 2) วิธี Agar well diffusion method โดยเพาะเลี้ยงเอนโดไฟติกแบคทีเรียใน Tryptic soy broth (TSB) ในเครื่องเขย่าที่ 37 ºC 200 รอบต่อนาที เป็นเวลา 48 ชั่วโมง นามาปั่นเหวี่ยงและนาส่วนใสไปทดสอบบน Mueller Hinton agar (MHA) บันทึกผลค่าเฉลี่ยโซนใส (zone of inhibition) หลังบ่มที่อุณหภูมิ 37ºC เป็นเวลา 24 ชั่วโมง พบจานวนเอนโดไฟติกแบคทีเรียที่มีฤทธิ์ยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อทดสอบ จานวน 7 ไอโซเลต, 3 ไอโซเลต, 2 ไอโซเลต, 3 ไอโซเลต, 0 ไอโซเลต, 2 ไอโซเลตและ 2 ไอโซเลตตามลาดับเชื้อทดสอบข้างต้น |
| abstract: This special project is intended to screening of endophytic bacteria for antimicrobial activities from 17 plants in Bangkok. The 58 isolates of endophytic bacteria were identified. Their antimicrobial activities against 7 microorganisms including Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC 25922, Klebsiella pneumonia ATCC 700603, Methicillin-resistance Staphylococcus aureus (MRSA) ATCC 43300, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Salmonella typhi ATCC 13311, Staphylococcus aureus ATCC 6538 were determined using two methods. First, cross streak method, streaked the endophytic bacteria on the middle of tryptic soy agar (TSA) and incubated at room temperature for 48 hours. Then 7 microorganisms were streak perpendicularly near the endophytic bacteria and incubated at 37ºC for 24 hours. There were inhibiting effects of 7 microorganisms as 20 isolates, 13 isolates, 4 isolates, 19 isolates, 2 isolates, 15 isolates and 20 isolates, respectively. Second, the agar well diffusion method, the endophytic bacteria were cultured in tryptic soy broth (TSB) and incubated in shaking incubator at 37°C 200 rpm for 48 hours, centrifuged and pipetted the supernatant solution to determine their antimicrobial activities on Mueller Hinton agar (MHA). According to the zone of inhibition, there were inhibiting effects of 7 microorganisms as 7 isolates, 3 isolates, 2 isolates, 3 isolates, 0 isolates, 2 isolates and 2 isolates, respectively. |
| . |